Laporan Praktikum Kimia Organik Percobaan 12 : Teknik Pemisahan dengan Kromatografi Kolom

 LAPORAN AKHIR PERCOBAAN 12

KIMIA ORGANIK I

 

 

 

 

 

 

 DISUSUN OLEH :

NURHAYATI

(A1C119077)

 

 

DOSEN PENGAMPU :

Dr. Drs. SYAMSURIZAL, M.Si.

 

 

 

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN KIMIA

JURUSAN MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

FAKULTAS KEGURUAN DAN ILMU PENDIDIKAN

UNIVERSITAS JAMBI

2021

VIII. DATA PENGAMATAN

No	Perlakuan	Fungsi Alat dan Bahan	Tujuan	Hasil
1	Kromotografi Kolom Bagian 1 1). Siapkan 4 bejana KLT yang diisi dengan 4 fase gerak yang berbeda 2). Siapkan 4 plat KLT dengan ukuran 3 x 10 cm, beri tanda batas bawah 1,5 cm dan batas atas 0,5 cm 3). Siapkan larutan baku EPMS dan larutan sampel ekstrak rimpang kencur 4). Totolkan larutan baku EPMS sebanyak 2 miu L dan ekstrak rimpang kencur sebanyak 4 miu L pada masing-masing plat KLT 5). Buat jarak antar noda 1,5 cm. usahakan diameter noda yang terbentuk tidak lebih dari 0,3 cm 6). Masukkan plat KLT pada bejana  yang sudah dijenuhkan 7). Eluasi hingga batas atas plat KLT 8). Visualisasi plat KLT dibawah UV 254 nm 9). Beri tanda noda yang terlihat dan hitung derajat keterpisahan alpha dari EPMS terhadap noda terdekat.	Bejana KLT, fungsi : wadah tempat fase gerak   Plat KLT, fungsi : tempat fase diam   Larutan baku EPMS, fungsi: sebagai sampel   Larutan ekstrak rimpang kencur : sebagai sampel	Disiapkan KLT bejana dengan tujuan untuk dijenuhkan          Disiapkan larutan untuk ditotolkan ke plat KLT  Ditotolkan untuk memberi noda pada plat KLT                         Dimasukkan agar terjadi elusi  Diberi tanda untuk menandakan noda dan mempermudah perhitungan	Berdasarkan hasil KLT fase gerak yang dipilih adalah : 1. Derajat keterpisahan antara senyawa target (EPMS) dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5 2. Tidak tailing 3. Nilai RF senyawa target (EPMS) 0,4-0,5
2	Kromotografi Kolom Bagian 2 1). Timbang silica gel sebanyak 50 gram 2). Masukkan silica gel kedalam labu Erlenmeyer 3). Tambahkan fase gerak terpilih hingga semua silica gel terbasahi 4). Aduk dengan batang pengaduk     5). Tutup dengan aluminium foil     6). Goyangkan labu Erlenmeyer untuk membantu supaya silica gel terbasahi secara merata dengan eluen 7). Tuangkan campuran silica gel dan eluen kedalam kolom dengan bantuan corong gelas 8). Buka stopper dibagian bawah kolom untuk mengeluarkan eluen 9). Jika masih ada sisa silica gel didalam labu Erlenmeyer, ditambahkan lagi eluen dan masukkan kedalam kolom 10). Tutup stopper dibagian bawah kolom 11). Pastikan eluen dalam kolom terisi penuh, kemudian tutup dengan aluminium foil dan rekatkan dengan karet gelang 12). Diamkan selama 1-2 jam sebelum digunakan (pada praktikum kali ini kolom dibiarkan selama 7 hari sebelum digunakan) 13). Siapkan 0,5 gram ekstrak rimpang kencur dan 0,5 gram silica gel 14). Tambahkan silica gel sedikit demi sedikit kedalam ekstrak 15). Aduk dengan spatula hingga homogen dan ekstrak menjadi kering (menjadi serbuk) 16). Buka penutup aluminium foil dari kolom 17). Keluarkan eluen dari kolom dengan cara membuka stopper dari bagian bawah kolom 18). Keluarkan eluen hingga batas 0,5 cm dari permukaan atas fase diam 19). Tutup stopper   20). Masukkan sampel kering kedalam kolom dan pastikan sampel terdistribusi merata diatas kolom 21). Siapkan silica gel sebanyak 0,5 gram dan masukkan kedalam kolom   22). Tambahkan eluen melalui dinding kolom dengan bantuan pipet Pasteur 23). Alirkan eluan dan tampung dalam baker 24). Beberapa ml eluan yang keluar pertama kali dari kolom belum mengandung senyawa kimia dari ekstrak, oleh karena itu tampungan ini bisa dibuang 25). Umumnya sekitar 50% dari volume kolom 26). Selanjutnya tampung fraksi dalam fial yang sudah ditara sebanyak 10 ml dan sudah ditandai dengan nomor 27). Atur kecepat alir 1 tetes per detik 30). Jika sudah penuh 10 ml ganti dengan vial berikutnya 31). Tutup vial dengan aluminium foil dan lubangi atasnya dengan bantuan jarum 32). Biarkan hingga Sebagian besar eluen menguap.	Silica gel, fungsi : sebagai fase diam   Labu erlenmeyer, fungsi : tempat campuran silica gel dan fase gerak   Batang pengaduk, fungsi : mempercepat campuran silica gel dan fase gerak   Alumunium foil , fungsi : menutup labu erlenmeyer   Kolom, fungsi : tempat terjadinya pemisahan   Corong gelas, fungsi : alat bantu memindahkan silica gel dan eluen   Karet gelang, fungsi : merekatkan aluminium foil sebagai penutup   Eluen, fungsi : sebagai fase gerak   Pipet Pasteur, fungsi : alat membantu memindahkan eluen   Beker, fungsi : tempat menampung eluen   Jarum, fungsi : melubangi aluminium foil	Untuk mempersiapkan silica gel       Ditambahi fase gerak dengan tujuan agar silica gel basah  Diaduk dengan tujuan agar larutan homogen Ditutup dengan tujuan agar larutan tidak terkontaminasi Digoyangkan dengan tujuan agar silica gel homogen dengan uluen     Untuk mempersiapkan langkah selanjutnya     Dibuka dengan tujuan untuk mengeluarkan eluen                   Untuk memberhentikan keluarnya eluen Hal ini untuk memastikan agar kolom tidak kering selama penyimpanan                       Untuk mempersiapkan sampel percobaan   Ditambahkan untuk mencampurkan kedua sampel Diaduk dengan tujuan agar homogen dan terbentuk serbuk   Untuk melakukan pemisahan kromatografi kolom Mengeluarkan eluen hingga batas 0,5 cm dari atas fase diam      Menghentikan kalurnya eluen   Untuk mencampurkan sampel           Hal ini untuk melindungi ekstrak supaya tetap rata pada saat ditambahkan eluen Untuk mencampurkan sampel     Dialirkan agar eluen keluar     Hasil eluen yang ditampung dibuang karena mengandung senyawa kimia dari ekstrak    Untuk memisahkan fraksi ke dalam fial-fial yang sudah dipersiapkan   Ditutup dengan aluminium dan dilubangi dengan bantuan jarum dengan tujuan agar eluen menguap	Berdasarkan  hasil KLT dari 4 fase gerak (video kromotografi kolom bagian 1) diperoleh fase gerak terpilih adalah n-heksana : etil asetat (4 : 1) Kombinasi ini terpilih karena : 1. Derajat keterpisahan antara senyawa target EPMS dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5 2. Tidak tailing 3. nilai Rf senyawa target (EPMS)  0,4-0,5.   Setelah beberapa hari tampungan akan menguap , jika hasil tampungan mengering maka perlu ditambahkan eluen beberapa tetes

 

IX.       PEMBAHASAN

Pada percobaan ini dilakukan untuk memisahkan menggunakan kromatografi kolom. Dimana pada percobaan ini dilakukan dua tahap, yaitu pada tahap pertama menyiapkan 4 bejana KLT yang diisi dengan 4 fase gerak yang berbeda. Selain itu juga menyiapkan 4 plat KLT dengan ukuran 3 x 10 cm, beri tanda batas bawah 1,5 cm dan batas atas 0,5 cm.  Dan yang terkahir juga menyiapkan larutan baku EPMS dan larutan sampel ekstrak rimpang kencur. Setelah semua sudah disiapkan maka diotolkan larutan baku EPMS sebanyak 2 miu L dan ekstrak rimpang kencur sebanyak 4 miu L pada masing-masing plat KLT dan dengan dibuat jarak antar noda 1,5 cm usahakan diameter noda yang terbentuk tidak lebih dari 0,3 cm. Setelahnya dimasukkan plat KLT pada bejana  yang sudah dijenuhkan dan terjadi eluasi hingga batas atas plat KLT. Setelah selesai maka visualisasi plat KLT dibawah UV 254 nm dan dieri tanda noda yang terlihat dan hitung derajat keterpisahan alpha dari EPMS terhadap noda terdekat.

Dari percobaan yang dilakukan pada tahap pertama ini maka didapatkan hasil yaitu berdasarkan KLT fase gerak yang dipilih dan didapatkan derajat keterpisahan antara senyawa target (EPMS) dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5. Selanjutnya tidak tailing dan juga memiliki nilai RF senyawa target (EPMS) 0,4-0,5.

Setelah pada tahap pertama telah selesai maka dilanjutkan dengan tahap yang kedua. Pada tahap kedua ini didapatkan hasil KLT dari 4 fase gerak (video kromotografi kolom bagian 1) diperoleh fase gerak terpilih adalah n-heksana : etil asetat (4 : 1). Kombinasi ini terpilih karena derajat keterpisahan antara senyawa target EPMS dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5. Selain itu juga tidak tailing dan memiliki nilai Rf senyawa target (EPMS)  0,4-0,5. Setelah beberapa hari tampungan akan menguap , jika hasil tampungan mengering maka perlu ditambahkan eluen beberapa tetes

X.          PERTANYAAN

1.             Pada hasil percobaan tidak tailing. Bagaimana yang dimaksud dengan tidak tailing tersebut?

2.             Mengapa dipilih penggunaan silica gel pada percobaan kromatografi kolom?

3.             Bagaimana yang menandakan bahwa percobaan kromatografi kolom ini berhasil dilakukan?

XI.       KESIMPULAN

Adapun kesimpulan dari percobaan ini yaitu :

1.             Berdasarkan hasil KLT fase gerak yang dipilih pada bagian 1 adalah derajat keterpisahan antara senyawa target (EPMS) dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5

2.             Berdasarkan  hasil KLT dari 4 fase gerak (video kromotografi kolom bagian 1) diperoleh fase gerak terpilih adalah n-heksana : etil asetat (4 : 1). Kombinasi ini terpilih karena derajat keterpisahan antara senyawa target EPMS dengan noda terdekat adalah alpha lebih besar sama dengan 1,5

XII.    DAFTAR PUSTAKA

Fabiani, V. A., Wahyuni, N., Brilliantoro, R., & Safitri, M. N. (2018). SINTESIS DAN KARAKTERISASI SILIKA GEL DARI LIMBAH KACA SERTA APLIKASINYA PADA KROMATOGRAFI KOLOM. Indonesian Journal of Pure and Applied Chemistry, 1(1), 10-16.

Oxtoby, D. W. 2001. Prinsip-prinsip Kimia Modern. Jakarta : Erlangga.